Культивирование эмбрионов

С помощью ЭКО оплодотворение и раннее развитие эмбриона происходят вне организма в эмбриологической лаборатории. Этот процесс охватывает несколько важных этапов перед переносом эмбриона.

Экстракорпоральное оплодотворение состоит из трех основных этапов, каждый из которых важен для успешной беременности.

• Стимуляция яичников и получение яйцеклеток. Гормональные препараты стимулируют яичники производить несколько зрелых яйцеклеток. Далее врач контролирует рост фолликула с помощью УЗИ и анализов крови. Когда яйцеклетки готовы, они извлекаются путем пункции яичников через влагалище специальной иглой под контролем ультразвукового исследования.
• Оплодотворение и культивация эмбриона. Полученные яйцеклетки оплодотворяются подготовленными сперматозоидами. Полученный биоматериал помещают в специальный инкубатор, где поддерживаются оптимальная температура и уровень pH, идентичные показателям здорового женского организма.
• Перенос и имплантация эмбриона. Лучший эмбрион(ы) отбирают и переносят в матку. Врач может назначить пациентке препараты прогестерона для поддержания имплантации. Приблизительно через 10–14 дней тест на беременность определяет, был ли ЭКО успешным.

Сегодня мы хотим поговорить именно о культивировании эмбрионов и что именно происходит на этом этапе.

Что происходит при культивировании эмбрионов?

Культивирование эмбрионов является решающим этапом ЭКО, который начинается с инсеминации и заканчивается переносом эмбриона в матку или криоконсервацией. Во время этого процесса эмбриологи следят за развитием эмбриона, оценивают качество эмбриона и выбирают лучшие эмбрионы для переноса.

Вместо того чтобы развиваться в организме женщины, эмбрионы культивируются в специальном инкубаторе до 7 дней, чтобы достичь стадии бластоцисты и иметь больше шансов на успешную имплантацию.

После перенесения эмбриона имплантация обычно происходит в течение 40 часов.

Как влияет качество эмбрионов на успех ЭКО?

При культивировании качество эмбрионов оценивают прежде всего по морфологическим (внешним) признакам:

• Количество клеток должно соответствовать ожидаемой стадии развития.
• Равномерность деления — эмбрионы должны иметь симметричный рост с минимальным временем нахождения на неравномерной клеточной стадии.
• Размеры клетки должны сохранять форму и быть одинаковыми по объему.
• Уровень фрагментации относится к соотношению нормальных бластомеров к безъядерным фрагментам (цитоплазматических фрагментов без ядра).

Классификация эмбрионов по фрагментации

Эмбрионы делятся на четыре класса на основе уровня фрагментации:

• Класс А — без ядерных фрагментов (высокое качество).
• Класс B — фрагменты составляют ≤ 20% объема эмбриона.
• Класс C — фрагменты составляют 21–50% эмбриона.
• Класс D — фрагментация превышает 50%.

Эмбрионы высшего класса обладают наилучшим потенциалом имплантации. Лишь наиболее жизнеспособные из них выбираются для пересадки в матку, что оптимизирует показатели успеха ЭКО.

Роль преимплантационного генетического тестирования (ПГТ)

В то же время оценка эмбрионов возлагается на морфологические критерии, молекулярный метод, в частности генетический анализ, предлагающий большую точность. Самым распространенным генетическим подходом является предимплантационное генетическое тестирование, которое помогает идентифицировать аномальные эмбрионы перед имплантацией, гарантируя отбор только генетически здоровых эмбрионов.

Такая диагностика служит двум основным целям:

• Выявление генетических причин неудачи ЭКО (неудачная имплантация или выкидыш).
• Предотвращение имплантации эмбрионов с серьезными генетическими нарушениями.

Три основных типа PGT:

• PGT-A (скрининг анеуплоидии) выявляет хромосомные аномалии, в частности синдром Дауна (трисомия 21), синдром Эдвардса (трисомия 18), синдром Патау (трисомия 13) и аномалии половых хромосом.
• PGT-M (тестирование на моногенные расстройства) выявляет наследственные моногенные заболевания, в частности спинальную мышечную атрофию, муковисцидоз, болезнь Хантингтона, серповидноклеточную анемию и мышечную дистрофию.
• PGT-SR (тестирование структурной перестройки) определяет хромосомные перестройки, например робертсоновские и реципрокные транслокации, которые могут привести к таким состояниям, как синдром Ди Георга.

Как выполняется ПГТ?

ПГТ — двухэтапный процесс, охватывающий:

1. Биопсию эмбриона, проводимую на стадии бластоциста (5 или 6 день). Клетки берутся из трофектодермы (будущей плаценты), гарантируя, что внутренняя клеточная масса (будущий плод) остается неприкосновенной.
2. Генетическое тестирование, во время которого вытянутые клетки проходят анализ ДНК для выявления аномалий. Эмбрионы сохраняются витрифицированными до получения генетического заключения и переноса.

Что говорят исследования?

В 2019–2020 годах исследователи Оттавского центра рождаемости изучали, увеличивается ли количество эмбрионов пригодных для витрификации во время культивирования до 6 суток. Исследователи проанализировали 3438 жизнеспособных эмбрионов из 679 циклов ЭКО, сравнивая результаты до и после смены протоколов.

Исследователи обнаружили, что доля эмбрионов, пригодных для витрификации, осталась одинаковой — 46,9% против 44,4%, однако количество криоконсервированных эмбрионов за цикл возросло до 2,2 против 1,7.

Это исследование подтверждает целесообразность расширенного культивирования эмбрионов и предоставляет ценную информацию врачам и эмбриологам.