FISH, що розшифровується як флуоресцентна гібридизація in situ, — це діагностичний метод, який використовується для аналізу хромосом сперматозоїдів. Це цінний інструмент для оцінки чоловічого безпліддя.

Цей тест спрямований на виявлення анеуплоїдій, тобто аномалій кількості хромосом у сперматозоїдах. У людини зазвичай 46 хромосом (23 пари), а сперматозоїди в ідеалі повинні нести 23 окремі хромосоми (по одній з кожної пари). FISH допомагає виявити, чи мають сперматозоїди занадто багато або занадто мало хромосом певного типу.

Хоча FISH може аналізувати всі хромосоми, найчастіше в спермі оцінюються хромосоми, які є фокус-хромосомами:

• Статеві хромосоми (X і Y) — для виявлення потенційних проблем, як-от синдром Клайнфельтера (XXY) або синдром Тернера (X).
• Хромосоми 13, 18 і 21 — оскільки вони пов'язані з поширеними трисоміями (наявність трьох копій замість двох), як-от синдром Дауна (трисомія 21). Залежно від історії хвороби пацієнта можуть бути проаналізовані й інші хромосоми.

Окрім цього застосовується для:

• Оцінка цілісності хромосом: Метод допомагає оцінити структурну цілісність хромосом, виявляючи транслокації, делеції, дуплікації та інверсії.
• Діагностика безпліддя: FISH може діагностувати хромосомні аномалії, які можуть сприяти чоловічому безпліддю, надаючи уявлення про потенційні генетичні причини низької якості сперми або повторних втрат вагітності.
• Передімплантаційне генетичне тестування (PGT): В контексті допоміжних репродуктивних технологій за результатами FISH можна додатково використовувати генетичне обстеження ембріонів з метою відбору ембріону з нормальним хромосомним набором.
• Науково-дослідні та клінічні дослідження: FISH використовується в дослідженнях для вивчення хромосомних аномалій у сперматозоїдах та їх впливу на фертильність і розвиток ембріонів.

Як працює FISH-діагностика сперматозоїдів

Зразок сперми збирається у пацієнта-чоловіка за допомогою мастурбації або іншими методами. Сперматозоїди фіксуються на предметному склі мікроскопа, а їх ДНК денатурується, щоб зробити її одноланцюговою, що дає змогу зв'язувати флуоресцентні зонди.

Флуоресцентно мічені ДНК-зонди, специфічні до певних хромосом або хромосомних ділянок, наносяться на зразок сперми. Ці зонди гібридизуються (зв'язуються) з комплементарними їм послідовностями ДНК на хромосомах сперматозоїдів. Надлишок зондів змивається, і зразок може бути забарвлений, щоб виділити ядра сперматозоїдів.

Підготовлений мазок досліджують під флуоресцентним мікроскопом. Флуоресцентні зонди випромінюють світло з певною довжиною хвилі, що візуалізує цільові ділянки хромосом.

Важливість FISH-діагностики в репродуктивній медицині

Переваги використання FISH-діагностики:

• Покращення методів лікування безпліддя: Виявляючи хромосомні аномалії в спермі, лікарі можуть приймати більш обґрунтовані рішення про відповідні методи лікування безпліддя, такі як ЕКЗ з ІКСІ (інтрацитоплазматична ін'єкція сперматозоїдів) з використанням генетичного обстеження ембріонів.
• Зниження генетичних ризиків: FISH-діагностика допомагає знизити ризик передачі генетичних порушень нащадкам.
• Персоналізовані плани лікування: Результати FISH можуть стати основою індивідуального плану лікування для пар, які страждають на безпліддя, повторювані викидні або мають в анамнезі генетичні захворювання.
• Покращення результатів вагітності: Використання FISH-діагностики в поєднанні з іншими репродуктивними технологіями може покращити результати вагітності шляхом покращення відбору життєздатних ембріонів з меншим ризиком генетичних аномалій.

Обмеження, які слід враховувати:

• FISH не аналізує всю сперму: він оцінює лише певну кількість сперматозоїдів у зразку, тому існує можливість пропустити аномалії в інших сперматозоїдах.
• Не гарантує успішної вагітності: навіть за нормальних результатів FISH інші чинники можуть сприяти проблемам з фертильністю.

Загалом діагностика сперматозоїдів за допомогою FISH є цінним інструментом в арсеналі уролога-андролога для оцінки чоловічого безпліддя та надання більш цілеспрямованих рекомендацій парам на шляху до батьківства. Цей метод допомагає діагностувати генетичні причини чоловічого безпліддя, ухвалювати щодо лікування та підвищувати шанси на успішну вагітність і народження здорових нащадків.

Автор: Кіпоть Владислав Романович — лікар уролог, андролог.